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Bioquímica Experimental

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Sobre a aula

Visão geral do processo de purificação de proteínas a partir de lisados celulares ou de outros tipos de mistura de proteínas. Discutem-se também as vantagens e aplicações de proteínas purificadas.

Disciplina

QBQ0316-5 Bioquímica Experimental

EMENTA

Princípios da quantificação de proteínas/compostos por espectrofotometria. Elaboração e uso de curvas padrão. Determinação de atividade enzimática. Efeito do pH sobre a catálise enzimática e determinação de pH ótimo. Determinação de parâmetros cinéticos de reações enzimáticas. Técnicas de purificação de proteínas. Cromatografia. Cálculos de recuperação e enriquecimento de atividade enzimática durante a purificação de proteínas. Eletroforese (SDS-PAGE). Sequenciamento de proteínas e peptídeos.

Objetivo

Instruir os alunos nas técnicas bioquímicas básicas, usando as mesmas para resolver problemas experimentais.

Índice de vídeos da disciplina

1. Prática Lise celular de leveduras
2. Separação de proteínas por eletroforese (SDS-PAGE)
3. vídeo - discussão aula 3
4. Aula 4 - Purificação de proteínas 1
5. Prática 2. Cromatografía de troca iônica
6. Aula 4 - Purificação de proteínas 2
7. Visão geral da purificação de proteínas
8. Prática 3. BRADFORD
9. Aula 4 - Purificação de proteínas 3
10. Equação Da Reta no Excel - Bradford
11. Aula 4 - Purificação de proteínas 4
12. Curva de Calibração em casa
13. Precipitação de proteínas pela adição de sal
14. Prática 5. Cinética Enzimática
15. Prática 4. Atividade Enzimática Alfa-glicosidase
16. Aula 5 - Ionização de cadeias laterais de aminoácidos
17. Cromatografias
18. Bases Teóricas da Dosagem de Biomoléculas
19. SDS-PAGE
20. Aula 6 - Cromatografia de Troca Iônica
21. aula 7 - Cromatografias
22. SDS-PAGE_Parte 2
23. Aula Cinética Enzimática
24. Espectrometria de massas e sequenciamento de proteínas
25. Inibição Enzimática

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